一、培养基的配制
1、制备时,可选择符合质量要求的商品化成品培养基,也可单独配方组成的进行配制;
2、不得使用结块、颜色发生变化或其他物理性状明显变化的培养基,确保质量符合要求;
3、商品化的培养基或单独配方组成的应在合适的条件下进行保存;
4、配制培养基时,确保质量的稳定可靠,商品化培养基应按照使用说明书进行配制,自制的应按照配方准确配制。称量过程应达到相应的准确度;
5、除特殊规定外,配制培养基常用的溶剂为纯化水;
6、配制培养基所用的容器不得影响其性能,一般为玻璃容器。使用前应用纯化水冲洗,清除清洁剂和外来物的残留。对于热敏感的培养基应提前进行灭菌,确保无菌性;
7、培养基应完全溶解混匀后再进行分装和灭菌;若需要助溶时,温度不宜过高,以免颜色变深或成分破坏。
二、培养基的灭菌
1、培养基的灭菌方法应按照说明书或验证试验参数的采用不同方法;一般采用湿热灭菌,特殊要求的采用薄膜过滤等;
2、采用不适当的灭菌可能会破坏培养基的质量,会改变颜色、透明度降低、pH变化等。因此培养基的灭菌程序应经过验证,灭菌方法和条件应可通过无菌试验和适用性检查进行验证;
3、每批培养基灭菌后应测定pH值,冷却至室温后(25℃),取出少量培养基以无菌操作进行测定。可用1mol/L HCL或1mol/L NaoH加以校正。处方中未列出pH值的范围,除非经验证表明培养基的pH值允许的变化范围很宽,否则,pH值的范围不能超过规定值+0.2。
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